Description des missions
La personne recrutée aura pour principale mission l’expression en systèmes recombinants ainsi que la purification de GPCRs et de protéines associées. Cela implique la mise en place de système de détection et de purification des complexes de signalisation et leur caractérisation fonctionnelle. La personne recrutée participera à la purification de vésicules extracellulaires et à la caractérisation structurale de complexe de signalisation sur des échantillons issus de cultures primaires de neurones en utilisant des approches de microscopie électronique en conditions cryogéniques (cryoEM, cryoET et cryoFIB).
Profil recherché
La personne recrutée aura pour principale mission l’expression en systèmes recombinants ainsi que la purification de GPCRs et de protéines associées. Cela implique la mise en place de système de détection et de purification des complexes de signalisation et leur caractérisation fonctionnelle. La personne recrutée participera à la purification de vésicules extracellulaires et à la caractérisation structurale de complexe de signalisation sur des échantillons issus de cultures primaires de neurones en utilisant des approches de microscopie électronique en conditions cryogéniques (cryoEM, cryoET et cryoFIB).Connaissances : • Connaissance approfondie de l’étude structurale des protéines membranaires • Connaissance approfondie des approches d’expression et de purification de protéines • Connaissance des techniques de microscopie électronique et de la préparationd’échantillons • Connaissance approfondie des bonnes pratiques de laboratoire • Connaissance de la réglementation en matière d’hygiène et de sécurité, notamment pour l’utilisation d’azote et d’éthane liquideL’Inserm est le seul organisme public français entièrement dédié à la recherche biologique, médicale et en santé des populations. Il dispose de laboratoires de recherche sur l’ensemble du territoire, regroupés en 12 Délégations Régionales. Notre institut réunit 15 000 chercheurs, ingénieurs, techniciens et personnels administratifs, avec un objectif commun : améliorer la santé de tous par le progrès des connaissances sur le vivant et sur les maladies, l’innovation dans les traitements et la recherche en santé publique. Rejoindre l’Inserm, c’est intégrer un institut engagé pour la parité et l’égalité professionnelle, la diversité et l’accompagnement de ses agents en situation de handicap, dès le recrutement et tout au long de la carrière. Afin de préserver le bien-être au travail, l’Inserm mène une politique active en matière de conditions de travail, reposant notamment sur un juste équilibre entre vie personnelle et vie professionnelle. L'Inserm a reçu en 2016 le label européen HR Excellence in Research et s'est engagé à faire évoluer ses pratiques de recrutement et d'évaluation des chercheurs. Activités principales :Préparation et purification des protéines complexes :• Mettre en œuvre des protocoles de purification des protéines complexes • Procéder à la caractérisation biochimique des protéines et des complexes protéiques • Mettre en œuvre des techniques de spectrométrie de masse, de cristallographie des rayons X et de résonance magnétique nucléaire • Optimiser les conditions expérimentales pour maintenir la stabilité et l’activité des protéinesEtudes de la signalisation cellulaire :• Réaliser des analyses biochimiques des voies de signalisation intracellulaire enlien avec les protéines complexes (Western Blot, ELISA, immunoprécipitation) • Investiguer les interactions entre les protéines de signalisation et les autres biomolécules dans des modèles cellulaires • Mettre en place des modèles expérimentaux visant à étudier l’impact des modifications post traductionnelles sur les fonctions de signalisationDéveloppement de nouvelles approches expérimentales :• Développer de nouvelles méthodologies pour la capture et l’analyse descomplexes protéiques • Optimiser les protocoles expérimentaux afin d’améliorer la sensibilité et laspécificité des analysesAnalyse et traitement des données expérimentales :• Procéder à l’analyse des résultats obtenus à partir des expériences biochimiques et de biophysique et traiter les données via des logiciels spécialisés • Rédiger des rapports d’analyse et de publications scientifiques en collaborationavec l’équipe de recherche • Participer aux réunions d’équipe pour discuter des résultats expérimentaux et des avancées du projetSavoir-faire : • Capacité à purifier et caractériser des protéines complexes • Capacité à procéder aux analyses des voies de signalisation, à la culture cellulaire, à l’immunoprécipitation et aux tests fonctionnels • Capacité à rédiger et présenter ses données scientifiques de manière rigoureuse • Capacité à rédiger et présenter des données expérimentales de manière rigoureuse • Capacité à interagir efficacement avec les différents acteurs scientifiques du projetSavoir-être : • Esprit d’équipe • Curiosité scientifique • Autonomie et prise d’initiative • Flexibilité et capacité d’adaptation • Sens de l’organisation et rigueur scientifiqueNiveau d'expérience : Une expérience dans un ou plusieurs de ces points est fortement souhaitée :• Imagerie de fluorescence • Culture cellulaire et biologie moléculaire • Biochimie des protéines membranaires • Microscopie électronique en condition cryogéniqueNiveau de formation : • Niveau Bac +3 en biologie structurale, biophysique ou biochimie • Niveau B2 ou C1 en anglais à minimaLe poste est à pourvoir au sein de l’Institut de Génomique Fonctionnelle (IGF), une unité mixte de recherche composée de 330 personnes et 23 équipes travaillant dans les domaines des neurosciences, de la physiologie et du cancer et hébergeant 7 plateaux techniques (génomique, protéomique, criblage pharmacologique, vectorologie, imagerie du petit animal, exploration fonctionnelle).